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亚麻籽油的安全性与功能性评价(2)
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摘要:式(3)中:K-碳廓清指数,表示吞噬速率;OD1-t1时的吸光度值;OD2-t2时的吸光度值;t1-给墨汁后第2 次取血的时间;t2-给墨汁后第2 次取血的时间;a-吞噬指
式(3)中:K-碳廓清指数,表示吞噬速率;OD1-t1时的吸光度值;OD2-t2时的吸光度值;t1-给墨汁后第2 次取血的时间;t2-给墨汁后第2 次取血的时间;a-吞噬指数,反映每单位组织质量的吞噬活性。
(4)血清溶血素的测定。将小鼠摘除眼球采血,2000 r·min-1离心10 min 进行血清的分离,用生理盐水稀释不同倍数并置于微量血凝板内,每孔100 μL,加入同体积的0.5%(v/v)的SRBC 悬液,混匀,37 ℃温箱孵育3 h,观察血球凝集程度[15]。按公式(5)计算抗体积数。
式中1、2、3......n 代表对倍稀释的指数,S 代表凝集程度的级别,抗体积数越大,表示血清抗体越高。0 级红细胞全部下沉,集中在孔底部形成致密的圆点状,四周液体清晰。
(5)迟发型变态反应(DTH)检测。末次给药5 h 后,对小鼠腹部皮肤约3 cm×3 cm 进行脱毛处理,用50 μL 的DNFB 溶液涂抹均匀致敏;5 d 后,再以10 μL 的上述溶液均匀涂抹小鼠右耳。24 h 后,颈椎脱臼处死小鼠,剪下左右耳,用打孔器取下直径8 mm的耳片称重,按公式(6)计算左右耳肿胀度差。
左右耳肿胀度差=右耳重量-左耳重量 (6)
1.4 数据处理
所有试验的平行试验次数至少3 次。实验数据以SPSS 软件进行单因素方差分析。经方差齐性检验,方差齐的实验数据采用LSD 法进行统计分析,方差不齐的实验数据采用Tamnane 法进行统计分析。当概率值≤0.05 时,判定为统计学显著。
2 结果与分析
2.1 亚麻籽油的安全性分析
2.1.1 对大鼠食物利用率的影响
亚麻籽油对大鼠食物利用率的影响见表1。由表1 可知,随着时间的增加,对照组与各剂量组大鼠的食物利用率呈降低趋势,与雌性大鼠比较,雄性大鼠的食物利用率普遍较高。其中,雄性大鼠的食物总利用率在34%左右,而雌性大鼠的食物总利用率在24%左右,与同性别同时期的对照组比较,大鼠的食物利用率无显著差异。说明受试样品亚麻籽油对大鼠的食物利用率无影响。
表1 亚麻籽油对大鼠食物利用率的影响表性别 组别 动物数/只第一周利用率/%第二周利用率/%第三周利用率/%第四周利用率/%总利用率/%雄对照组 10 47. 41. 32. 24. 34.低剂量组 10 47. 39. 34. 24. 34.中剂量组 10 47. 40. 32. 23. 34.高剂量组 10 45. 43. 32. 24. 34.雌对照组 10 42. 30. 20. 12. 24.低剂量组 10 43. 29. 21. 13. 24.中剂量组 10 42. 32. 19. 12. 23.高剂量组 10 43. 31. 18. 13. 24.
2.1.2 亚麻籽油对大鼠病理组织学的影响
各剂量组大鼠检查未发现明显病变,且生化指标未见异常,因此仅选对照组及高剂量作组织病理学检查。大鼠胃、肠、脾、卵巢和睾丸病理检测结果见表2,大鼠肝脏与肾脏病理检测结果见表3。由表2、表3 可知,正常肝小叶结构存在,肝细胞无明显肿胀及颗粒变性,个别肝细胞浆内出现少许细小的脂肪空泡,呈轻度脂肪变,脂变干细胞呈散在小灶分布,范围小。干细胞无坏死改变,少数肝小叶、肝汇管区见淋巴细胞等炎细胞浸润,无纤维组织增生,胆管未见异常;胃和十二指肠黏膜完整,无明显出血、坏死、糜烂、溃疡及炎细胞浸润,无明显腺体增生萎缩改变;肾皮髓质结构清楚,肾小管无明显肿胀及空泡变性,个别肾间质中有灶性炎细胞浸润,个别肾髓质部可见小囊肿;脾白髓、红髓结构清楚,白髓、红髓无明显扩张或萎缩现象;睾丸曲细精管正常,可见各级生精细胞及成熟精子;卵巢发育正常,可见各级卵泡和成熟黄体。综合可知,以上病理学改变仅个别动物中发生,各组标本病理变化无明显差异,因此,亚麻籽油对各脏器未产生病理学改变。
表2 大鼠病理检测的结果表注:对照组、高剂量组大鼠雌雄各10 只,下同。病理指标 对照组 高剂量组 病理指标 对照组 高剂量组雄 雌 雄 雌 雄 雌 雄 雌黏膜出血/例 0 0 0 0 色素沉着/例 0 0 0 0水肿/例 0 0 0 0 囊肿/例 0 0 0 0炎细胞浸润/例 0 0 0 0 生精上皮细胞减少/例 0 0 0 0坏死/例 0 0 0 0 生精上皮细胞变性/例 0 0 0 0萎缩/例 0 0 0 0 生精上皮细胞坏死/例 0 0 0 0增生/例 0 0 0 0 多核巨细胞浸润/例 0 0 0 0红髓扩张/例 0 0 0 0 间质出血/例 0 0 0 0白髓萎缩/例 0 0 0 0 间质水肿/例 0 0 0 0造血细胞增生/例 0 0 0 0 其他/例 0 0 0 0
表3 大鼠肝脏与肾脏病理检测结果表(例)病理指标 对照组 高剂量组 病理指标 对照组 高剂量组雄 雌 雄 雌 雄 雌 雄 雌肝小叶 被膜改变 0 0 0 0 皮质部 肾小管坏死 0 0 0 0坏死 0 0 0 0 肾小管肿胀 0 0 0 0出血 0 0 0 0 肾小管空泡变 0 0 0 0空泡变 1 1 1 1 肾小管管型 0 0 0 0颗粒变性 0 0 0 0 肾小管炎症细胞浸润 0 0 0 0肝细胞索断裂 0 0 0 0 肾小球变性 0 0 0干细胞肿胀 0 0 0 0 间质内炎细胞浸润 1 0 0 0炎症细胞浸润 2 2 2 2 其他 0 0 0 0其他 0 0 0 0 髓质部 曲管上皮坏死 0 0 0 0汇管区 坏死 0 0 0 0 曲管上皮肿胀 0 0 0 0出血 0 0 0 0 曲管上皮空泡变 0 0 0 0胆管增生 0 0 0 0 曲管上皮管型 0 0 0 0炎症细胞浸润 2 2 2 2 曲管上皮炎症细胞浸润 0 0 0 0其他 0 0 0 0 间质细胞浸润 0 0 0 0被膜改变 0 0 0 0 小囊肿 0 1 0 0肾盂部乳头改变 0 0 0 0 移形上皮细胞改变 0 0 0 0
文章来源:《立体定向和功能性神经外科杂志》 网址: http://www.ltdxhgnxsjwkzz.cn/qikandaodu/2021/0205/331.html